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        技術(shù)文章

        Technical articles

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        植物(Plant)過氧化物酶(POD)ELISA檢測試劑盒

        更新時間:2012-04-12點擊次數(shù):1434

        本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
        植物(Plant)過氧化物酶(POD)ELISA檢測試劑盒
        使用說明書
        檢測原理
        試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)
        先包被過氧化物酶(POD)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)
        品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,
        TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終
        的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化物酶(POD)呈正相關(guān)。用酶
        標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
        樣品收集、處理及保存方法
        1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化
        物酶(HRP)的抑制劑。
        2. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行。
        3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即
        可檢測。
        4. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
        -20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
        自備物品
        1. 酶標(biāo)儀(450nm)
        2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
        3. 37℃恒溫箱
        操作注意事項
        1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
        濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解
        后再使用。
        2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
        3. 濃度為0 的S0 號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明
        書操作時樣本已經(jīng)稀釋5 倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實際濃度。
        4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。結(jié)果判斷
        繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)
        OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣
        本濃度值。
        試劑盒性能
        1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,大于等于
        0.9900。
        2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 U/L。
        3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
        4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
        5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
        6. 有效期:6 個月
        免責(zé)聲明
        1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所
        產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
        2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者
        承擔(dān)。