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        技術(shù)文章

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        植物(Plant)超氧化物歧化酶(SOD)

        更新時(shí)間:2012-04-12點(diǎn)擊次數(shù):1406

        本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
        植物(Plant)超氧化物歧化酶(SOD)
        ELISA檢測(cè)試劑盒
        使用說(shuō)明書(shū)
        檢測(cè)原理
        試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)
        先包被超氧化物歧化酶(SOD)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、
        標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯
        色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
        zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的超氧化物歧化酶(SOD)呈正相
        關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
        樣品收集、處理及保存方法
        1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化
        物酶(HRP)的抑制劑。
        2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。
        3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,取上清即
        可檢測(cè)。
        4. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于
        -20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
        自備物品
        1. 酶標(biāo)儀(450nm)
        2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
        3. 37℃恒溫箱
        操作注意事項(xiàng)
        1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
        濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解
        后再使用。
        2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
        3. 濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明
        書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5 倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。OD 值。
        結(jié)果判斷
        繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)
        OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣
        本濃度值。
        試劑盒性能
        1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值,大于等于
        0.9900。
        2. 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于1.0U/mL。
        3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
        4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
        5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
        6. 有效期:6 個(gè)月
        免責(zé)聲明
        1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所
        產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
        2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者
        承擔(dān)。